Development of quantitative sample preparation protocol for targeted metabolome analysis of adenine nucleotides and coenzymes by means of field enhanced sample stacking-capillary zone electrophoresis combination
Název česky | Kvantitativní příprava vzorku intracelulárních adeninových nukleotidů a koenzymů pro analýzu pomocí CZE |
---|---|
Autoři | |
Rok publikování | 2008 |
Druh | Konferenční abstrakty |
Fakulta / Pracoviště MU | |
Citace | |
Popis | Při studiu mikrobiálních metabolitů je zapotřebí použít nejen vhodnou analytickou metodu, ale i spolehlivý a reprodukovatelný postup pro přípravu vzorku (kultivace biomasy, zhášení metabolismu, extrakce cílových metabolitů,..). Tento úkol je mnohdy velmi nelehký, jelikož intracelulární metabolity jsou chemicky značně odlišné a vyskytují se v buňce v širokém koncentračním rozmezí. K optimalizaci extrakce adeninových nukleotidů (ATP, ADP, AMP) a koenzymů (NAD+, NADH, NADP+ and NADPH) z bakterie Paracoccus denitrificans bylo použito vodných roztoků organických rozpouštědel jako metanol, etanol a acetonitril (100 %, 80 %,50 % a 20 %) a dále směsi acetonitril/metanol/voda (40:40:20), tato směs s přídavkem 0.1 M kys. mravenčí a s přídavkem 0.1 M NH4OH. Výtěžky z extrakcí byly analyzovány na CZE a porovnány mezi sebou. |
Související projekty: |