Sledování stability transgenu u Drosophila melanogaster pomocí teplotní gredientové gelové elektroforézy a sekvencování

Varování

Publikace nespadá pod Fakultu sportovních studií, ale pod Přírodovědeckou fakultu. Oficiální stránka publikace je na webu muni.cz.

Autoři	SKALICKÁ Kamila CHROUST Karel
Rok publikování	2001
Druh	Článek ve sborníku
Konference	V. Pracovní setkání biochemiků a molekulárních biologů
Fakulta / Pracoviště MU	Přírodovědecká fakulta
Citace
Obor	Genetika a molekulární biologie
Klíčová slova	transgenic Drosophila melanogaster; DGGE
Popis	Drosophila melanogaster je v dnešní době široce vyhledávaný modelový organizmus. Vyznačuje se relativně malým genomem (~180 Mb, ~13 600 genů) a stává se častým hostitelem cizorodých genů, které jsou do jejího genomu nejčastěji vnášeny pomocí vektorů odvozených od P elementu. Cílem naší práce bylo sledování stability transgenu u kmene P-1152, který má v cytologické oblasti 1A (chromozom X) stabilně začleněn genový konstrukt P-lacZ-ry-adh. Mutace byly vyvolávány pomocí silného metylačního činidla N-nitroso-N-methylurea (MNU) u larev druhého nebo třetího instaru, které byly chronicky exponovány různým koncentracím vodných roztoků MNU. Pro sledování možných mutačních změn ve jmenovaném transgenu byli vybíráni hemizygotní jedinci. Pomocí polymerázové řetězové reakce byl amplifikován 309 pb dlohý úsek transgenu lacZ, který byl analyzován pomocí teplotní gradientové gelové elektroforézy (TGGE) a sekvencováním.
Související projekty:	Genomy a jejich funkce