| Popis |
Úvod: MikroRNA (miRNA), krátké nekódující RNA, se podílejí na patogenezi mnohočetného myelomu (MM) a je možné, že jsou zapojeny i do vzniku extramedulární formy MM (EM). Cirkulující miRNA jsou stabilní, kvantifikovatelné v tělních tekutinách a mají potenciál stát se diagnostickým markerem, jak bylo dříve prokázáno u MM. Cílem této studie bylo identifikovat profil cirkulujících miRNA pomocí TaqMan Low Density Arrays (TLDA) a kvantitativní PCR (qPCR) u pacientů s EM, MM a zdravých dárců (ZD) a porovnat hladiny exprese deregulovaných miRNA s klinickými parametry. Metody: Celkově bylo do studie zahrnuto 100 vzorků séra EM pacientů, nově diagnostikovaných MM pacientů a ZD. TLDA screening 667 miRNA byl proveden u 5 EM, 5 MM a 6 ZD. Vybrané rozdílně exprimované miRNA (p<0,05) mezi vzorky EM a MM a mezi EM a ZD byly potvrzeny pomocí qPCR s využitím absolutní kvantifikace u 35 EM, 35 MM a 30 ZD. Byla provedena ROC analýza každé sledované miRNA a jejich kombinací a také korelace s biochemickými parametry u EM a MM. Výsledky MiRNA profilování odhalilo 14 deregulovaných miRNA (vš. p<0,05, po korekci p<0,41) mezi MM a EM a 20 miRNA deregulovaných mezi EM a ZD (vš. p<0,05, po korekci p<0,40). Hladiny exprese miR-222, miR-130a, miR-34a a miR-195 byly dále ověřeny na větším souboru vzorků EM, MM a ZD. Hladina miR-130a byla významně snížena, miR-222 a miR-34a naopak zvýšena u EM ve srovnání se ZD (vš. p<0,005); navíc miR-130a byla snížena a miR-34a zvýšena u EM oproti MM (p<0,06). ROC analýza kombinace miR-130a a miR-34a odlišila EM od ZD se senzitivitou 74,3 %, specificitou 90 % a AUC=0,879. Dále, tato kombinace miRNA při porovnání EM s MM odlišila EM se senzitivitou 54,3 %, specificitou 80 % a AUC=0,675. V EM souboru, miR-130a pozitivně korelovala s hladinou hemoglobinu a počtem trombocytů (rs=0,397 a 0,439, vš. p<0,05), a negativně s hladinou monoklonálního imunoglobulinu, p2-mikroglobulinu a C-reaktivního proteinu (rs= 0,398,-0,427 a -0,488, vš. p<0,05). Hladina exprese této miRNA asociovala s vyšším stádiem ISS (p=0,017). MiR-222 pozitivně korelovala s hladinou laktát dehydrogenázy (rs=0,417, p<0,05); miR-222 a miR-34a byly v pozitivní asociaci s procentuální infiltrací kostní dřeně plazmatickými buňkami (rs=0,435 a 0,562, p<0,05). Závěr: Naše výsledky ukazují, že sérové miR-130a a miR-34a by se mohly stát slibnými biomarkery pacientů s extramedulární formou MM.
|