Stanovení celkové hladiny IgM u sladkovodních ryb
Title in English | Determination of total IgM level in freshwater fish |
---|---|
Authors | |
Year of publication | 2009 |
Type | Conference abstract |
MU Faculty or unit | |
Citation | |
Description | Imunitní systém ryb je stejně jako imunitní systém obratlovců složen ze specifických a nespecifických složek buněčné a humorální imunity. Hlavní součástí specifické humorální imunity jsou protilátky imunoglobuliny (Ig). Ig se specificky váží na antigen a zpřístupňují jej ostatním složkám imunitního systému. U ryb se na rozdíl od vyšších obratlovců nachází pouze IgM, kdy tetramerní molekula je nejčastěji tvořena 4 monomery spojenými J-řetězcem. Pro stanovení Ig ryb se používá velké množství metod (RIA, FIA, EIA, imunoprecipitace), které jsou složité na přípravu, časově náročné a díky velké spotřebě monoklonálních protilátek drahé (pro některé druhy ryb ani nejsou protilátky dostupné). Srážení síranem zinečnatým (ZnSO4 . 7H2O) je jednoduchá, levná a časově nenáročná metoda, která využívá fyzikálněchemických vlastností ZnSO4 . 7H2O. Metoda je běžná ve veterinární praxi. ZnSO4 . 7H2O odebírá selektivně imunoglobulinům v roztoku vodu a ty poté z roztoku vypadávají, vzniká sraženina. Metoda je doplněna stanovením bílkovin, kdy se výsledná koncentrace IgM rovná rozdílu mezi bílkovinami obsaženými v celém vzorku a v supernatantu po vysrážení IgM. Pro naše experimenty byla použita plasma kapra obecného (Cyprinus carpio) odebíraná v různých ročních obdobích, lína obecného (Tinca tinca) s různými ploidiemi a karasa stříbřitého (Carassius auratus) s různými ploidiemi včetně kříženců. U kapra obecného byla zjištěna statisticky významná sezónní dynamika hladiny IgM s nejvyššími hodnotami v červnu 20,15 g/l a nejnižšími v srpnu 12,42 g/l. Rovněž byly zaznamenány statisticky významné rozdíly mezi pohlavími, s vyššími průměrnými hodnotami IgM u samic kapra i lína. Diploidní (2n), triploidní (3n) a gynogenní (G) skupiny lína se statisticky neliší, i když G ryby mají průměrně vyšší hladinu IgM než 2n a 3n. 2n a 3n karasi se opět statisticky neliší, i když průměrná hladina IgM 2n je nižší než 3n a kříženců. Tato práce byla podpořena granty GAČR 524/07/0188 a 524/09/P620. |
Related projects: |